№4, 2025, том 21

Статья посвящена профессору Валентину Сергеевичу Сперанскому (1925–2015), доктору медицинских наук, заслуженному деятелю науки РФ, возглавлявшему кафедру анатомии человека с 1967 по 1996 г. В работе описаны основные этапы научной биографии исследователя, посвятившего кафедре более 40 лет своей жизни. Выдающийся ученый-анатом нашего времени профессор В.С. Сперанский внес значительный вклад в развитие кафедры и анатомии в целом. Созданная им краниологическая школа является одной из ведущих в России и получила признание за рубежом.

Статья посвящена 75-летию со дня рождения выдающегося представителя саратовской хирургической школы страны, талантливого ученого и педагога, заведующего кафедрой общей хирургии Саратовского государственного медицинского университета имени В.И. Разумовского доктора медицинских наук, профессора Юрия Григорьевича Шапкина.

Цель: создание и оценка потенциала биоинженерной in vitro-модели эндотелиальной ниши костного мозга для поддержки и активации гемопоэтических стволовых клеток человека. Материал и методы. Использованы человеческие лимфоциты, изолированные из мононуклеарных клеток периферической крови. Изготовлены серии платформ с различными активированными поверхностями лунок 24-луночных планшетов: отдельно фибронектин, отдельно поли-D-лизин, фибронектин и поли-D-лизин, поли-D-лизин и анти-CD3- антитела. В течение 7-дневного культивирования проводили визуальный мониторинг состояния клеточных популяций методом прямой микроскопии, оценку жизнеспособности с окрашиванием трипановым синим, оценочный тест на адгезионную активность. Результаты. В условиях эксперимента жизнеспособность лимфоцитов поддерживалась на высоком уровне >80% для всех тестовых платформ и в контроле соответственно, с сохранением типичной для лимфоцитов морфологии. Использование платформы 24T_FN с активатором фибронектином показало неравномерно распределенные клеточные островки и образование крупных конгломератов. Платформа 24T_pDl на основе поли-D-лизина продемонстрировала высокую степень равномерности 2D-распределения клеток с образованием отдельных скоплений в пределах 50–100 клеток. Адгезионная активность на 7-й день эксперимента на платформах 24T_FN и 24T_pDl была в пределах 60–70%, в 3 раза превосходя данные для контроля. Наилучшие показатели выживаемости, адгезионной активности, 2D-распределения клеток продемонстрировала комбинированная платформа 24T_pDl@AbCD3 с покрытием поли-D-лизином в комбинации с анти-CD3-антителами. Заключение. В условиях модельных экспериментов in vitro продемонстрирована возможность длительного монослойного субкультивирования лимфоцитарных клеток человека с высокой адгезионной активностью на синтетической платформе с активированной поверхностью поли-D-лизином в комбинации с антителами, аффинными к CD3+-Т-клеткам.

Цель: адаптация технологии репрограммирования генома на основе лазерной трансфекции для создания биомедицинских клеточных продуктов. Материал и методы. В работе использованы разработанные платформы для оптотрансфекции на основе многолуночных культуральных планшетов с покрытием рабочей поверхности монослоем наночастиц золота. Модельные клеточные эксперименты по доставке молекулярного агента пропидиум иодида выполнены на клетках мышиных макрофагов линии RAW 264.7. Трансфекцию клеточных монослоев, адгезированных на платформах 24-луночных планшет со слоями нанозвезд золота, проводили путем однократного 2D-сканирования импульсным лазером с узкосфокусированным пучком. Оценку жизнеспособности и эффективности модификации клеток проводили посредством прямой микроскопии и с применением метаболических тестов. Результаты. Определены оптимальные рабочие режимы лазерной оптотрансфекции клеток макрофагов мыши RAW 264.7: энергия импульса – 1,4 мкДж, длительность импульса – 200 нс, скважность импульса – 10 кГц, скорость сканирования – 0,025 м/с. Выявлены значения минимальной стартовой конфлюэнтности монослоя 40%, эффективности трансфекции 78±7,6% жизнеспособности клеток 84±9,3%. Заключение. В условиях модельных экспериментов in vitro продемонстрирована возможность тонкой регулировки параметров оптотрансфекции для обеспечения воспроизводимых результатов генетической модификации лимфоцитоподобных клеток с высокими показателями эффективности и жизнеспособности.

Цель: определить ключевые молекулярно-цитогенетические технологии анализа хромосомных нарушений, направленные на своевременную диагностику и мониторинг социально значимых наследственных заболеваний человека. Методика написания обзора. Систематический обзор выполнен по методологии PRISMA (Preferred reporting items for systematic reviews and meta-analyses) с использованием баз данных PubMed, eLibrary, Google Scholar, CyberLeninka. Глубина поиска – с 2000 по 2025 г. Для написания обзора использовано 50 источников. Заключение. Обзор научных публикаций свидетельствует о значительном потенциале развития молекулярно-генетических технологий и методов оптической визуализации для повышения качества диагностических лабораторных исследований. Анализ исследований, посвященных определению хромосомных нарушений, выявил появление новых технологий (хромосомный микроматричный анализ, оптическое картирование генома) в диагностике ранее малоизученных наследственных заболеваний. Исследования последних лет в области микроскопической техники, связанные с разработкой методов высокого разрешения для прямой люминесцентной визуализации молекулярно-цитогенетических данных, направлены на кардинальное улучшение идентификации предикторов многочисленных хромосомных заболеваний человека. Современные тенденции развития биоинженерии и нанобиотехнологий направлены на создание специализированных многоцветных молекулярных зондов и гибридных наноразмерных меток, которые увеличивают временную и экономическую эффективность хромосомного анализа, что делает его удобным для проведения крупномасштабных скрининговых исследований.

Цель: разработать простую и удобную технологию выявления ДНК-мишеней для диагностики социально значимых заболеваний на основе колориметрического агрегационного теста с использованием наночастиц золота. Материал и методы. Синтез наносфер золота осуществлялся методами жидкофазной химии. Физико-химические параметры наночастиц контролировались методами спектроскопии поглощения, динамического светорассеяния, электронной микроскопии. Рациональный дизайн последовательностей специфических фрагментов геномных мишеней и олигонуклеотидов, входящих в состав тест-системы, осуществлялся с учетом термодинамических констант и с применением геномных баз. Аналитическую валидацию тест-системы проводили на модели выявления ДНК Babesia species – возбудителя пироплазмоза человека и животных, путем кросс-сравнения характеристик с полимеразной цепной реакцией с электрофоретическим учетом результатов и в формате реального времени. Результаты. Разработан пилотный вариант тест-системы для специфического обнаружения до 10 нг ДНК в образцах крови путем визуальной дискриминации цвета реакционной смеси при длительности анализа примерно 30 мин. Выявлен размерный эффект наночастиц в диапазоне от 15 до 60 нм на минимальный предел обнаружения ДНК-мишеней. Заключение. В настоящей работе представлены результаты разработки и аналитической валидации пилотной версии экспресс-тест-системы для ДНК-диагностики на основе меток наночастиц золота и визуальной дискриминации цвета реакционной смеси.

Цель: разработка и валидация хроматомасс-спектрометрической методики количественного определения кукурбитацина B в плазме крови и гомогенатах печени, почек и сердца мышей и оценка содержания и динамики концентрации кукурбитацина В в крови животных при однократном пероральном введении. Материал и методы. Изучение фармакокинетики выполнено на 60 беспородных мышах мужского пола массой 28,0±3,0 г. Животные получали экстракт аврана лекарственного сухой в виде водного раствора. Для разработки методики количественного определения кукурбитацина В использовали высокоэффективный жидкостной хроматограф Agilent Technologies 1260 Infinity II и масс-спектрометр AB Sciex QTrap 3200 MD. Хроматографическое разделение осуществляли на аналитической колонке Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 с градиентной подвижной фазой. Пробоподготовка плазмы крови мышей заключалась в осаждении белков метанолом. Результаты. На основании результатов определения кукурбитацина В в плазме крови мышей после однократного внутрижелудочного введения аврана лекарственного экстракта в дозе 220,0 мг/кг выявлено, что во всех анализируемых образцах уровень сигнала находится ниже уровня предела количественного измерения. Заключение. Разработана биоаналитическая методика определения кукурбитацина В в плазме крови мышей с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием, подобраны параметры идентификации кукурбитацина В в плазме крови мышей после однократного внутрижелудочного введения аврана лекарственного экстракта.

Цель: оценить влияние местного применения стоматологического геля с микрокапсулированным витамином D на показатели микроциркуляции десны при экспериментальном пародонтите у белых крыс. Материал и методы. Исследованы 60 белых крыс (по 15 в каждой из 4 групп): контрольная – интактные животные; сравнения – крысы с пародонтитом на 3-й неделе; плацебо – крысы с пародонтитом, которым наносили гель с микрокапсулами наночастиц серебра 0,1; опытная – крысы с пародонтитом, которым на поверхность десны наносили гель, содержащий микрокапсулы с витамином D. Микроциркуляцию исследовали методом лазерной допплеровской флоуметрии на 21-е сутки эксперимента. Результаты. У животных группы сравнения наблюдали повышение перфузии и изменение активных и пассивных механизмов модуляции кровотока. Гель, содержащий наночастицы серебра, снижал перфузионный показатель на 13% и умеренно корректировал эндотелийзависимые колебания по сравнению с таковыми у животных с пародонтитом. Применение геля с витамином D у особей опытной группы сопровождалось снижением перфузионного показателя на 15% по сравнению с животными с пародонтитом на 3-й неделе. Амплитуда эндотелиальных колебаний в опытной группе снижалась на 42% относительно группы сравнения. Нейрогенные и миогенные колебания в группе, получающей лечение с применением геля, содержащего витамин D, были ниже на 47 и 43% соответственно по сравнению с животными с пародонтитом на 3-й неделе. Заключение. Применение геля, содержащего витамин D в микрокапсулах, обеспечивает нормализацию микроциркуляторных параметров десны у крыс с экспериментальным пародонтитом.

Цель: выявить изменения пула регуляторных Т-клеток (Treg) и уровень экспрессии на их мембране индуцируемого Т-клеточного ко-стимулятора (ICOS) и белка программируемой клеточной гибели (PD-1) в метастатически пораженных лимфатических узлах при раке толстой кишки (РТК). Материал и методы. Основную группу составили 105 больных РТК III стадии. Группа клинического сравнения – неопухолевая патология (аномалии развития, стомы, дивертикулярная болезнь толстой кишки). Изучение пула Treg и экспрессии PD-1 и ICOS проводили методом проточной цитометрии. Результаты. В метастатически пораженных лимфатических узлах при РТК в 3,5 раза возрастает содержание Treg (p<0,001), уменьшается относительное количество наивных Treg (p<0,001), почти в 2 раза (p<0,001) увеличивается число Treg центральной памяти, экспрессирующих на своей мембране CD197, и в 3,6 раза (p<0,001) – клеток эффекторной памяти, имеющих фенотип CD45RА–CD197–. Количество Treg PD-1−ICOS+ в общей популяции CD3+-лимфоцитов увеличивается в 3,1 раза (p<0,001). Число Treg, имеющих фенотип CD19−CD3+CD4+CD25highCD127−PD-1+ICOS+, возрастает в 1,5 раза (p<0,001) по отношению к контролю. Заключение. У больных РТК в метастатически пораженных лимфатических узлах уменьшается число наивных Treg, возрастает относительное содержание Treg центральной и эффекторной памяти, увеличивается количество Treg, экспрессирующих ICOS, а также одновременно экспрессирующих как ингибирующий белок PD-1, так и стимулирующую молекулу ICOS.

Цель: выделить наиболее точную краниометрическую схему для определения анатомического расположения латеральной борозды головного мозга у мужчин зрелого возраста с различными формами черепа. Материалы и методы. В исследование включены компьютерные томограммы 257 мужчин зрелого возраста, из которых относились к следующим периодам зрелости: 113 – к I (21–35 лет), а 144 – ко II (36–60 лет). Использованы методы краниоцефалометрического анализа для оценки локализации латеральной борозды. Краниометрические схемы строились по методикам Тейлора – Хотона, Брока, Крёнлейна (Kocher-Keen) и Ротона. Результаты. Наиболее распространенной формой черепа среди участников исследования была брахикранная (46,9% среди мужчин I периода зрелого возраста и 56,2% среди мужчин II периода зрелого возраста). При долихокрании расположение латеральной борозды наилучшим образом соответствовало методу Ротона (82%; p=0,04 – мужчины I периода зрелого возраста; p=0,015 – мужчины II периода зрелого возраста). У мужчин с брахикранной формой черепа наибольшее соответствие показал метод Тейлора – Хотона (78%; p=0,02 – мужчины I периода зрелого возраста; p=0,003 – мужчины II периода зрелого возраста), при мезокранной форме – метод Крёнлейна (р>0,05). Заключение. Выявлены оптимальные схемы для определения расположения латеральной борозды головного мозга при использовании компьютерной томографии для мужчин долихо- и брахикранной форм головы. Для мужчин с мезокранией оптимальная схема не выявлена, что делает необходимым дальнейшее изучение приемлемых подходов для этой краниологической группы.