ФГАОУ ВО «Новосибирский национальный исследовательский государственный университет»

Цель: исследовать возможность диагностики функциональной сохранности трансплантатов роговицы человека на основе оценки транспорта воды и ионов натрия клетками эндотелия роговицы свиньи. Материал и методы. Исследование проводилось на дисках роговицы свиньи. Оценка динамики объема клеток выполнялась методом, основанным на эффекте гашения флуоресценции красителя Calcein белками цитоплазмы. Содержание внутриклеточного натрия исследовалось методом флуоресцентной микроскопии с использованием специфического для натрия красителя Sodium Green. Для исследования динамики десвеллинга матрикса роговицы применяли микрофлуидную проточную камеру. Результаты. Повышение температуры с 20 до 37°С активирует Na/K-АТФазу, что запускает снижение объема клеток эндотелия роговицы. Экспоненциальная аппроксимация профиля флуоресценции дает траекторию, отражающую снижение клеточного объема с характерным временем 73,5±12,6 секунды (п=6). Экспоненциальная аппроксимация профиля флуоресценции красителя Sodium Green, отражающая изменение относительной концентрации внутриклеточного натрия, соответствовала снижению концентрации этого иона с характерным временем 130,0±26,3 секунды (п=5). Эксперименты с температурной активацией насосной активности клеток эндотелия позволили определить начальную скорость снижения объема матрикса: 0,36±0,006 um/s (п=5). Заключение. Оценка динамики изменения объема клеток эндотелия и содержания в них натрия, динамика десвеллинга после прекращения холодовой консервации