Саратовский научно-медицинский ЖУРНАЛ

Никитина В.А.

ФГБУ «Государственный научный центр Российской Федерации — Федеральный медицинский биофизический центр им. А. И. Бурназяна» ФМБА России, биолог криобанка центра биомедицинских технологий, кандидат медицинских наук

Применение клеточных технологий при термических ожоговых повреждениях кожи (Опыт ФГБУ ГНЦ ФМБЦ им А. И. Бурназяна ФМБА России)

Год: 2019, том 15 Номер: №4 Страницы: 999-1004
Рубрика: Тематическое приложение Тип статьи: Оригинальная статья
Авторы: Самойлов А. С, Астрелина Т.А., Аксененко А.В., Кобзева И.В., Сучкова Ю.Б., Никитина В.А., Усупжанова Д.Ю., Брунчуков В.А., Брумберг В.А., Расторгуева А.А., Махова А.Е., Карасева Т.В., Ломоносова Е.Е., Добровольская Е.И., Удалов Ю.Д.
Организация: ФГБУ «Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава России, ФГБУ «Государственный научный центр Российской Федерации — Федеральный медицинский биофизический центр им. А. И. Бурназяна» ФМБА России
Резюме:

Цель: проанализировать результаты применения аутологичных регенеративных клеток жировой ткани (ЖТ) в комплексной терапии ожоговых пациентов с глубокими термическими поражениями. Материал и методы. Применение клеточных технологий осуществлено 5 пациентам (4 мужчины и 1 женщина) в возрасте 23-45 лет с термическими ожоговыми повреждениями кожи III—IV степени различной этиологии и локализации, площадью поражения от 1 до 80%. Пациенты получали общепринятую консервативную терапию ожоговых ран. После стабилизации общего состояния и положительной динамики местного процесса в ране во время проведения плановых хирургических обработок ожоговых поверхностей пациенты получали биологический материал ЖТ. Объем липоаспирата ЖТ составил 195,0±74,2 мл. Для клинического применения ЖТ получали стромально-васкулярную фракцию (СВФ)ЖТ Пациентам осуществляли интрадермальное введение СВФЖТ в количестве от 10 млн до 50 млн клеток в объеме 5 мл в 10-15 точек вокруг повреждения кожных покровов. Результаты. При осмотре через 2,5 месяца с момента введения СВФ ЖТ у пациентов отмечались хорошие косметические и функциональные результаты. Кожа мягкая, эластичная, отсутствуют грубые гипертрофические и келоидные рубцы, а также контрактуры. Рубцы не выделяются. Движения в суставах сохранены. Заключение. Применение СВФ ЖТ в ранние сроки после травмы способствовало активизации репаративных процессов в дерме, что снижало местную воспалительную реакцию, ускоряло сроки эпителизации, восстановления эластичности кожных покровов с уменьшением выраженности фиброзных рубцов и приводило к отсутствию ограничений подвижности в суставах.

Прикрепленный файлРазмер
2019_04-1_999-1004.pdf1.1 Мб

Использование трехцветного FISH-метода окраски хромосом при анализе радиационно-индуцированных аберраций хромосом: пилотное исследование

Резюме:

Цель: сравнить частоты радиационно-индуцированных транслокаций, выявляемых с помощью трехцветного FISH-метода, при использовании различных наборов ДНК-зондов. Материал и методы. Материалом для цитогенетического исследования послужила венозная кровь одного здорового донора мужского пола, подвергнутая гамма-облучению in vitro в дозах 0,1-3,0 Гр. Культивирование лимфоцитов и приготовление препаратов хромосом осуществляли с помощью вариантов стандартных методик. Хромосомы окрашивали раздельно трехцветными ДНК-зондами: для 1, 4 и 12 пар и для 2, 3 и 8 пар. Результаты. Возрастание дозы вызывало увеличение частоты транслокаций при использовании обоих наборов ДНК-зондов. При применении любого из них частоты FISH-регистрируемых транслокаций во всех клетках (стабильных и нестабильных) существенно не отличались от аналогичной величины только в стабильных клетках. Сравнение частот транслокаций, выявляемых с помощью ДНК-зондов разных видов, также показало отсутствие статистически существенных различий как во всех, так и в стабильных клетках. Заключение. Использование двух выбранных наборов ДНК-зондов продемонстрировало отсутствие значимых различий между ними по наблюдаемым частотам индуцированных радиацией транслокаций хромосом.

Прикрепленный файлРазмер
2019_04-1_982-985.pdf287.76 кб

Разработка протокола комплексной криоконсервации кровеносных сосудов для создания тканеспецифичных матриксов

Год: 2017, том 13 Номер: №4 Страницы: 891-900
Рубрика: радиационная медицина Тип статьи: Оригинальная статья
Авторы: Лаук-Дубицкий С. Е., Астрелина Т.А., Брумберг В.А., Никитина В.А., Сучкова Ю.Б., Усупжанова Д.Ю., Брунчуков В.А., Расторгуева А.А., Ломоносова Е.Е., Кобзева И.В., Махова А.Е., Карасева Т.В., Бушманов А.Ю., Самойлов А.С.
Организация: ФГБУ «Государственный научный центр Российской Федерации — Федеральный медицинский биофизический центр им. А. И. Бурназяна Федерального медико-биологического агентства»,
Резюме:

Цель: разработать протокол комплексной криоконсервации кровеносных сосудов в полидиметилсилоксане для создания тканеспецифичных матриксов. Материал и методы. Материалом исследования являлись подвздошные артерии от посмертных доноров, изъятые в рамках мультиорганного донорства, отбракованные по невостребованности и утилизированные впоследствии. В качестве хладотеплоносителя использовался поли-диметилсилоксан (ПДМС) вязкостью 5-25 сантистокс (Спектропласт, Россия). Проводили стендовые испытания скорости охлаждения и нагрева кровеносного сосуда в ПДМС, тестирование нагрева и охлаждения ПДМС до рабочих температур (-80°С) разными способами и вариантов его теплоизоляции. Оценивали различные скорости охлаждения сосуда во время криоконсервации. Выполняли моделирование трех типов рабочих камер для криоконсервации, стерилизации и размораживания до десяти сосудов, моделирование схем криоконсервации и размораживания сосудов в ПДМС в разных условиях; подбор подложек из силикона и пластику для равномерной фиксации сосудов разных типоразмеров в рабочих камерах или без них. Результаты. Разработанный протокол дает возможность криоконсервировать от 1 до 10 и более сосудов всех основных типоразмеров как сразу после изъятия, так и после транспортировки в лабораторию; варьировать скорость охлаждения от 1,5 до 300°С/мин и выше; использовать лаборатории с разным уровнем комплектации, как с жидким азотом, сухим льдом, так и только с медицинским морозильником. Заключение. Разработанный протокол позволяет применять его в случаях комплексной криоконсервации кровеносных сосудов для создания тканеспецифичных матриксов и может быть рекомендован для проведения доклинических испытаний

Прикрепленный файлРазмер
2017_04-1_891-900.pdf2.63 Мб

Оценка применения полидиметилсилоксана низкой вязкости для криоконсервации и радиационной стерилизации сосудистых аллографтов человека

Год: 2016, том 12 Номер: №4 Страницы: 662-670
Рубрика: радиационная медицина Тип статьи: Оригинальная статья
Авторы: Лаук-Дубицкий С.Е., Астрелина Т.А., Брумберг В.А., Федюнин А.А., Камышников О.Ю., Вострухин С.В., Гордеев А.В., Паклина О.В., Кобзева И.В., Никитина В.А., Сучкова Ю.Б., Усупжанова Д.Ю., Брунчуков В.А., Карасева Т.В., Бушманов А.Ю., Самойлов А.С.
Организация: ФГБУ «Государственный научный центр Российской Федерации — Федеральный медицинский биофизический центр им. А. И. Бурназяна Федерального медико-биологического агентства», , ГБУ «Городская клиническая больница им. С.П. Боткина»
Резюме:

Цель: изучение потенциальных протекторных свойств полидиметилсилоксана низкой вязкости при криоконсервации и радиационной стерилизации сосудистых аллографтов человека маргинального происхождения для тканевой инженерии. Материал и методы. Проведена серия опытов, изучающих эндоцеллюлярные протекторные свойства полидиметилсилоксана (далее — ПДМС) при криоконсервации суспензии мезенхимальных стволовых клеток, с контролем и использованием рутинного протокола с 10% ДМСО; экзоцеллюлярные протекторные свойства ПДМС с циклической криоконсервацией сегментов одного сосуда — бедренной артерии человека; протекторные свойства ПДМС во время радиационной стерилизации трех криоконсервированных сегментов бедренной артерии маргинального происхождения длинной до 3 см по сравнению с группой контроля, для которой применялся модифицированный метод консервации кожных лоскутов в глицерине для последующей стерилизации. Использовались методы оценки динамической вязкости на экспериментальном измерительном стенде с предварительной проверкой его применимости, метод электронной сканирующей микроскопии, в т.ч. с лантаноидным окрашиванием клеток, а также гистологические исследования. Результаты. Опыты показали ярко выраженное экзоцеллюлярное протекторное действие ПДМС, подтвержденное электронной микроскопией и гистологическим исследованием, а также его опосредованное радиопротекторное действие, в частности из-за гляциофобности и более безопасной процедуры предварительной криоконсервации по тестам оценки динамической вязкости. Заключение. Использование ПДМС для криоконсервации и радиационной стерилизации показало свою целесообразность, однако требует дальнейшей модификации протоколов и дополнительных исследований.

Прикрепленный файлРазмер
2016_04-1_662-670.pdf2.67 Мб

Новый метод комплексной криоконсервации и радиационной стерилизации сосудистых аллотрансплантатов человека для тканевой инженерии

Год: 2015, том 11 Номер: №4 Страницы: 624-632
Рубрика: Генетика Тип статьи: Оригинальная статья
Авторы: Лаук-Дубицкий С.Е., Астрелина Т.А., Сапрыкин В.П., Федюнин А.А., Паклина О.В., Гордеев А.В., Шакуров А.В., Беликов Н.В., Хайдукова И.В., Бурков И.А., Антонов Е.А., Пономарев Д.Е., Кобзева И.В., Саврасов Г.В., Воробьев Г.В., Брумберг В.А., Никитина В.А., Сучкова Ю.Б., Добровольская Е.И., Карасева Т.В., Губарев К.К., Бушманов А.Ю., Самойлов А.С.
Организация: ФГБУ «Государственный научный центр Российской Федерации — Федеральный медицинский биофизический центр им. А. И. Бурназяна Федерального медико-биологического агентства», , ФГБОУ ВПО «Московский государственный технический университет им. Н.Э. Баумана», ГБУ «Городская клиническая больница им. С.П. Боткина»
Резюме:

Цель: оценить новые способы криоконсервации, размораживания и стерилизации сосудистых аллотрансплантатов человека маргинального происхождения для тканевой инженерии с помощью перспективного хла-доносителя— полидиметилсилоксана и без использования криопротекторных и витрифицирующих растворов, что позволит использовать эти аллотрансплантаты после размораживания и децеллюляризации, а также разработать протокол безопасной криоконсервации сложных тканеинженерных сосудистых конструкций. Материал и методы. После математического моделирования процесса охлаждения и его тестирования проведен опыт по изолированному замораживанию в условиях низких температур с помощью хладоносителя— полидиметилсилоксана 30 участков бедренных артерий длиной не менее 10 см от 15 маргинальных доноров в возрасте 65-85 лет с одинаковым распределением по полу. После процедуры размораживания в этом же хладоносителе аллотрансплантаты были подвергнуты проверке их физико-механических свойств на аппарате Instron. По итогам проведено моделирование режима их стерилизации в замороженном виде. Результаты. Оценка физико-механических свойств и ограниченное гистологическое исследование показали соответствие параметров размороженных аллотрансплантатов из одной из шести групп с нативными сосудами. Остальные данные требуют дополнительной проверки. Заключение. Опробованный метод криоконсервации и размораживания аллотрансплантатов показал эффективность и возможность использования в дальнейшей работе.

Прикрепленный файлРазмер
2015_04-01_624-632.pdf1.19 Мб