Саратовский научно-медицинский ЖУРНАЛ
Главная

Функциональная активность эндотелия роговицы свиньи

Год: 2020, том 16 Номер: №2 Страницы: 584-587
Рубрика: Глазные болезни Тип статьи: Оригинальная статья
Авторы: Батурина Г. С, Каткова Л.Е., Соленое Е.И., Пальчикова И. Г., Искаков И. А.
Организация: ФГБУН «Конструкторско-технологический институт научного приборостроения Сибирского отделения Российской академии наук», ФГБНУ ФИЦ «Институт цитологии генетики Сибирского отделения Российской академии наук», ФГАУ «НМИЦ "МНТК 'Микрохирургия глаза' им. акад. С.Н. Фёдорова"» Минздрава России, ФГАОУ ВО «Новосибирский национальный исследовательский государственный университет»
Резюме:

Цель: исследовать возможность диагностики функциональной сохранности трансплантатов роговицы человека на основе оценки транспорта воды и ионов натрия клетками эндотелия роговицы свиньи. Материал и методы. Исследование проводилось на дисках роговицы свиньи. Оценка динамики объема клеток выполнялась методом, основанным на эффекте гашения флуоресценции красителя Calcein белками цитоплазмы. Содержание внутриклеточного натрия исследовалось методом флуоресцентной микроскопии с использованием специфического для натрия красителя Sodium Green. Для исследования динамики десвеллинга матрикса роговицы применяли микрофлуидную проточную камеру. Результаты. Повышение температуры с 20 до 37°С активирует Na/K-АТФазу, что запускает снижение объема клеток эндотелия роговицы. Экспоненциальная аппроксимация профиля флуоресценции дает траекторию, отражающую снижение клеточного объема с характерным временем 73,5±12,6 секунды (п=6). Экспоненциальная аппроксимация профиля флуоресценции красителя Sodium Green, отражающая изменение относительной концентрации внутриклеточного натрия, соответствовала снижению концентрации этого иона с характерным временем 130,0±26,3 секунды (п=5). Эксперименты с температурной активацией насосной активности клеток эндотелия позволили определить начальную скорость снижения объема матрикса: 0,36±0,006 um/s (п=5). Заключение. Оценка динамики изменения объема клеток эндотелия и содержания в них натрия, динамика десвеллинга после прекращения холодовой консервации

Ключевые слова: эндотелий роговицы, холодовая консервация, объем клетки, десвеллинг, внутриклеточный натрий

Литература:
1. Maurice DM. The location of the fluid pump in the cornea. J Physiol 1972; 221 (1): 43-54.
2. Bonanno JA. Molecular Mechanisms Underlying the Corneal Endothelial Pump. Exp Eye Res 2012; 95 (1): 2-7.
3. Zarogiannis SG, et al. Regulatory volume decrease of rat kidney principal cells after successive hypo-osmotic shocks. Math Biosci 2013; 244 (2): 176-87.
4. Solenov E, et al. Sevenfold-reduced osmotic water permeability in primary astrocyte cultures from AQP-4-deficient mice, measured by a fluorescence quenching method. Am J Physiol Cell Physiol 2004; 286 (2): 426-32.
5. Hoffmann EK, Lambert IH, Pedersen SF. Physiology of cell volume regulation in vertebrates. Physiol Rev 2009; 89 (1): 193-277.
6. Wehner F, et al. Hypertonic activation of a non-selective cation conductance in HeLa cells and its contribution to cell volume regulation. FEBS Lett 2003; 551 (11): 20-4.
7. Батурина Г. С, Пальчикова И. Г., Конев А. А. и др. Исследование влияния гипотермической консервации на уровень натрия в клетках эндотелия трансплантата роговицы. Вавиловский журнал генетики и селекции 2018; 22 (4): 433-7.
8. Батурина Г. С, Каткова Л.Е., Пальчикова И. Г., Соленов Е.И., Искаков И.А. Новые подходы к исследованию функциональной активности клеток эндотелия препаратов роговицы глаза. Современные технологии в офтальмологии 2019; 5 (30): 262-5.

Прикрепленный файлРазмер
2020_02-1_584-587.pdf439.33 кб
Все статьи авторов: Соленов Е. И., Пальчикова И. Г., Каткова Л. Е., Искаков И. А. , Батурина Г. С.

Голосов пока нет